ELOVL3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-407282

Übersicht

ELOVL3 (Elongation von sehr langkettigen Fettsäuren, Protein 3) ist eine im endoplasmatischen Retikulum lokalisierte Elongase, die die Verlängerung gesättigter und einfach ungesättigter Fettsäure‑Acyl‑CoAs katalysiert und dadurch sehr langkettige Fettsäuren erzeugt, die für die Biosynthese komplexer Lipide benötigt werden. Über seine Rolle in der Fettsäureelongation trägt ELOVL3 zur Lipidhomöostase, zur Membranzusammensetzung sowie zur Bildung lipidabgeleiteter Signal- und Speicherpools bei, die den zellulären Stoffwechsel beeinflussen. Die ELOVL3‑Aktivität ist mit lipidmetabolischen Programmen in Geweben mit hohem Lipidumsatz verknüpft, und eine Fehlregulation von Elongationswegen wird häufig im Kontext metabolischer Dysbalancen und lipidgekoppelten zellulären Stresses untersucht. Eine veränderte Zusammensetzung sehr langkettiger Fettsäuren kann die Organellenfunktion und entzündliche Signalwege beeinflussen, wodurch ELOVL3 ein relevanter Knotenpunkt für mechanistische Studien zu Phänotypen im Zusammenhang mit dem Lipidstoffwechsel ist.

Das ELOVL3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des ELOVL3-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des ELOVL3-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von ELOVL3 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die ELOVL3-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von ELOVL3-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der ELOVL3-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf ELOVL3-Exone abzielen, die für die ELOVL3-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere ELOVL3-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom ELOVL3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom ELOVL3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des ELOVL3-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das ELOVL3 HDR-Plasmid (h) und ELOVL3 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von ELOVL3-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten ELOVL3-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.