
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
elafin CRISPR 활성화 플라스미드(h) | sc-401832-ACT | 20 µg | $397.00 |
PI3는 염증 동안 상피 장벽의 무결성을 유지하기 위해 호중구 엘라스타아제와 관련 프로테아제를 억제하는 분비형 세린 프로테아제 억제제인 엘라핀(elafin, 펩티다아제 억제제 3로도 알려짐)을 암호화합니다. 엘라핀은 프로테아제에 의해 유도되는 세포외기질(ECM) 분해를 제한하고 사이토카인이 풍부한 미세환경을 조절함으로써 점막 선천면역과 조직 재형성에 관여합니다. 엘라핀의 발현은 기도, 피부, 위장관 상피에서 염증성 신호에 반응해 역동적으로 조절되며, PI3를 상처 회복과 숙주 방어 같은 과정과 연결합니다. 조절이 깨진 PI3/엘라핀 수준은 만성 염증성 질환 및 다양한 상피 질환 맥락에서 관찰되는 프로테아제–항프로테아제 불균형과 연관되어 왔으며, 면역학 및 장벽 생물학 연구에서 기전적 마커로 활용될 근거를 뒷받침합니다.
elafin CRISPR 활성화 플라스미드(h)는 기본 DNA 서열을 변경하지 않고 내인성 PI3 발현을 상향 조절하는 표적화된 비파괴적 접근법을 제공합니다.
elafin CRISPR 활성화 플라스미드(h)는 인간 세포주에서 PI3 유전자좌의 고효율, 위치 특이적 전사 상향 조절을 위해 설계된 3개의 플라스미드로 구성된 시너지 활성화 매개체(SAM) 시스템입니다. 이 시스템은 DNA 결합 능력은 유지하면서 뉴클레아제 활성을 제거하는 두 가지 비활성화 돌연변이(D10A 및 N863A)를 지닌 촉매 활성 없는 Cas9(dCas9)을 중심으로 구축되었습니다. 이 dCas9은 강력한 전사 활성화제인 VP64와 융합되어 있으며, 선별을 위해 블라스티시딘 내성 유전자와 함께 발현됩니다. 두 번째 플라스미드는 dCas9-VP64와 협동하여 작용하는 2차 활성화 복합체인 MS2-p65-HSF1 융합 단백질을 암호화하며, 히그로마이신 내성 유전자와 함께 존재한다. 세 번째 플라스미드는 표적 특이적 20nt sgRNA를 암호화하며, 이는 MS2-p65-HSF1 복합체를 활성화 부위로 유인하는 두 개의 MS2 RNA 아파타머와 융합되어 있으며, 푸로마이신 내성 유전자가 함께 포함되어 있습니다. 세 플라스미드는 모든 시스템 구성 요소의 균형 잡힌 발현을 위해 질량비 1:1:1로 전달됩니다.
표적 부위에 조립되면 SAM 복합체는 PI3 전사 시작점의 상류 약 200bp 지점에 결합하며, 이곳에서 VP64, p65 및 HSF1이 협력하여 전사 기구를 모집하고 내인성 elafin 발현의 상향 조절을 유도합니다. 핵산분해 활성을 가진 Cas9과 달리, dCas9은 이중 가닥 절단을 유발하거나 게놈 서열을 변형시키지 않아, 원형 PI3 위치를 보존하고 내인성 위치에서 elafin 의존적 전사 반응을 연구할 수 있게 하여, 기능 연구, 표적 유전자 식별 및 PI3 발현이 침묵되거나 감소된 종양 세포에서 elafin 경로 복원을 모델링하는 데 유용한 도구입니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.