Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
EBP1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402177
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- EBP1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico EBP1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: EBP1 Anticuerpo (C-11): sc-393114
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
EBP1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402177 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
PA2G4 codifica EBP1, un factor de unión a ARN y proteínas que se localiza tanto en el citoplasma como en el núcleo y participa en la coordinación de la expresión génica a nivel transcripcional y translacional. EBP1 se ha vinculado con la señalización aguas abajo de las tirosina quinasas receptoras y con la regulación de la progresión del ciclo celular, la proliferación y la diferenciación mediante la modulación de la estabilidad del ARNm, procesos asociados a los ribosomas y programas transcripcionales. Al influir en vías de control del crecimiento y en redes de expresión génica sensibles al estrés, PA2G4 se estudia con frecuencia en el contexto de la señalización oncogénica y otras enfermedades caracterizadas por una proliferación desregulada. Sus funciones multifacéticas lo convierten en un nodo útil para desentrañar cómo las señales de factores de crecimiento se integran con el metabolismo del ARN y la regulación asociada a la cromatina en células humanas.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO EBP1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen PA2G4 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del PA2G4 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de PA2G4 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína EBP1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en PA2G4 para la investigación de la señalización de EBP1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de PA2G4 críticos para la función de EBP1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de PA2G4 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido EBP1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido EBP1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus PA2G4. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR EBP1 (h) y el plásmido HDR EBP1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología PA2G4 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana PA2G4 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.