EBP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402177

Visão geral

PA2G4 codifica a EBP1, um fator de ligação a RNA e proteínas que se localiza tanto no citoplasma quanto no núcleo e participa da coordenação da expressão gênica nos níveis transcricional e traducional. A EBP1 tem sido associada à sinalização a jusante de receptores tirosina-quinase e à regulação da progressão do ciclo celular, da proliferação e da diferenciação por meio da modulação da estabilidade de mRNAs, de processos associados aos ribossomos e de programas transcricionais. Ao influenciar vias de controle do crescimento e redes de expressão gênica responsivas ao estresse, PA2G4 é frequentemente estudado no contexto da sinalização oncogênica e de outras doenças caracterizadas por proliferação desregulada. Seus papéis multifacetados a tornam um nó útil para investigar como sinais de fatores de crescimento são integrados ao metabolismo de RNA e à regulação associada à cromatina em células humanas.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO EBP1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PA2G4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PA2G4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PA2G4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína EBP1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PA2G4 para a investigação da sinalização de EBP1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PA2G4 críticos para a função EBP1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PA2G4 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo EBP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo EBP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PA2G4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo EBP1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR EBP1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PA2G4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PA2G4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.