E4BP4 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401353

Descripción general

NFIL3 codifica el factor de transcripción de cremallera de leucina básica E4BP4, un regulador de la expresión génica dependiente del contexto que integra señales circadianas con programas inmunitarios y metabólicos. E4BP4 influye en la diferenciación y la función efectora a lo largo de los linajes linfoides, incluida la regulación de redes de citocinas y vías de supervivencia, y contribuye al control homeostático de la señalización inflamatoria. También interactúa con circuitos transcripcionales que moldean las respuestas celulares al estrés y la sincronización del desarrollo, vinculando la regulación rítmica con redes reguladoras génicas más amplias. La actividad desregulada de NFIL3/E4BP4 se ha asociado, en entornos de investigación, con patología mediada por el sistema inmunitario, fenotipos hematológicos y fenotipos metabólicos y circadianos alterados.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO E4BP4 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen NFIL3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del NFIL3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de NFIL3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína E4BP4.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en NFIL3 para la investigación de la señalización de E4BP4, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de NFIL3 críticos para la función de E4BP4
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de NFIL3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido E4BP4 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido E4BP4 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus NFIL3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR E4BP4 (h) y el plásmido HDR E4BP4 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología NFIL3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana NFIL3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.