E-cadherin CRISPR/Cas9 KOプラスミド (canine): sc-437341

概要

E-カドヘリン（CDH1）はカルシウム依存性の細胞間接着糖タンパク質で、イヌ細胞におけるアドヘレンスジャンクションの形成と上皮組織の恒常性維持に関与します。E-カドヘリンは細胞質側でカテニンと結合することでアクチン細胞骨格と連結し、上皮の極性、接触阻害、バリア機能を調節します。E-カドヘリンの欠失や機能異常はジャンクションのシグナル伝達を乱し、上皮間葉転換（EMT）プログラムを促進し得ます。その結果として、Wnt/β-カテニンシグナル、細胞移動、浸潤に関連する表現型などに下流影響が及びます。E-カドヘリン発現やジャンクション構造の変化は、上皮組織における腫瘍進展、線維化、炎症性リモデリングの文脈で一般的に研究されています。

E-cadherin CRISPR/Cas9 KOプラスミド（canine）は、canine細胞株における遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、E-cadherinタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、E-cadherinシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• E-cadherinの機能に不可欠なエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• E-cadherin CRISPR/Cas9 KOプラスミド（canine）およびE-cadherin CRISPR/Cas9 KOプラスミド（canine2）によってコードされるgRNAは、遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  E-cadherin HDRプラスミド（canine）および E-cadherin HDRプラスミド（canine2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定の標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。