DUSP22 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-430587

Descripción general

Dusp22 codifica la fosfatasa de doble especificidad 22 (DUSP22), una fosfatasa MAPK atípica que modula la señalización dependiente de la fosforilación mediante la desfosforilación de residuos de serina/treonina y tirosina en sustratos específicos. En células murinas inmunes y no inmunes, DUSP22 se ha relacionado con la regulación de la dinámica de la vía MAPK, incluidos nodos de señalización sensibles al estrés y a mitógenos que determinan salidas transcripcionales como programas de citocinas, umbrales de activación y apoptosis. A través de su impacto en el equilibrio quinasa–fosfatasa, DUSP22 influye en decisiones de proliferación y diferenciación celular que con frecuencia se ven alteradas en condiciones inflamatorias y en la biología del cáncer. La señalización alterada de DUSP22 se ha asociado con desregulación inmunitaria y con la reconfiguración de vías oncogénicas, lo que la hace relevante para estudios mecanísticos de fenotipos dependientes de la señalización.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO DUSP22 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Dusp22 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Dusp22 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Dusp22 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína DUSP22.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Dusp22 para la investigación de la señalización de DUSP22, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Dusp22 críticos para la función de DUSP22
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Dusp22 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido DUSP22 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido DUSP22 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Dusp22. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR DUSP22 (m) y el plásmido HDR DUSP22 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Dusp22 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Dusp22 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.