Plasmide Double Nickase (h) DTX3L: sc-403953-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) DTX3L correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide DTX3L Double Nickase (h) et le plasmide DTX3L Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant DTX3L. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: DTX3L Antibody (D-10): sc-514776
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) DTX3L | sc-403953-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) DTX3L | sc-403953-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DTX3L (deltex E3 ubiquitin ligase 3L) code une ligase E3 de l’ubiquitine qui coopère avec PARP9 pour réguler l’ubiquitination des protéines en réponse à la signalisation par les interférons et au stress cellulaire. En modulant le renouvellement des protéines dépendant de l’ubiquitine et des processus associés aux dommages de l’ADN, DTX3L influence les voies de l’immunité innée, la signalisation liée à la chromatine et le maintien de l’intégrité du génome. Son activité a été associée à la régulation de programmes transcriptionnels inflammatoires et des réponses à l’infection virale, ce qui la rend pertinente pour les études de l’homéostasie immunitaire. Des altérations de l’expression de DTX3L ou de l’engagement de sa voie ont été rapportées dans de multiples contextes pathologiques, notamment la signalisation liée au cancer et la dysrégulation immunitaire, ce qui soutient des investigations mécanistiques dans des modèles cellulaires humains.
DTX3L Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus DTX3L dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de DTX3L. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de DTX3L. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de DTX3L.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.