Dlx-3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-405063

Übersicht

DLX3 kodiert den Homeobox-Transkriptionsfaktor Dlx-3, einen DNA-bindenden Regulator, der für von Ektoderm und Neuralleiste abgeleitete Linienprogramme essenziell ist, darunter epidermale Differenzierung, Morphogenese der Haarfollikel, Odontogenese und kraniofaziale Entwicklung. Dlx-3 moduliert transkriptionelle Netzwerke, die Zellschicksalsfestlegung, Gewebemusterbildung und terminale Differenzierung koordinieren, und interagiert dabei mit übergeordneten entwicklungsbiologischen Signalachsen wie BMP- und Wnt-abhängigen genregulatorischen Schaltkreisen. In der menschlichen Biologie ist eine veränderte DLX3-Funktion mit Defekten an ektodermalen Anhangsgebilden und kraniofazialen Strukturen verbunden, was seine Rolle in epithelial–mesenchymalen Interaktionen widerspiegelt. Als transkriptioneller Regulator stellt Dlx-3 einen gut untersuchbaren Knotenpunkt dar, um Lineage-Commitment, Barrierebildung und differenzierungsassoziierte Transkriptionsprogramme zu erforschen.

Das Dlx-3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des DLX3-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des DLX3-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von DLX3 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Dlx-3-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von DLX3-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Dlx-3-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf DLX3-Exone abzielen, die für die Dlx-3-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere DLX3-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Dlx-3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom Dlx-3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des DLX3-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Dlx-3 HDR-Plasmid (h) und Dlx-3 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von DLX3-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten DLX3-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.