CXXC5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403248

概要

CXXC5（CXXC型ジンクフィンガータンパク質5）は、CXXCドメインを介してCpGリッチなDNAに結合し、転写のエピジェネティック制御と連動する核内・細胞質の調節因子である。状況依存的にWnt/β-カテニンシグナル伝達を調節し、細胞運命決定、増殖、分化を司る経路に関与するほか、造血系および神経系プログラムにおける役割も報告されている。さらにCXXC5は、増殖因子やストレス応答シグナルを転写出力へと結び付け、クロマチン関連過程や遺伝子発現ダイナミクスに影響を与える。CXXC5の発現異常は、複数の疾患関連コンテキストで観察されるWntシグナルの破綻や分化状態の変化と関連付けられており、発生機構および腫瘍性シグナル伝達の理解に向けた研究対象として支持されている。

CXXC5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCXXC5遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CXXC5内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CXXC5のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CXXC5タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CXXC5シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CXXC5欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CXXC5の機能に不可欠なCXXC5エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CXXC5ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CXXC5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCXXC5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CXXC5遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CXXC5 HDRプラスミド（h）および CXXC5 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCXXC5ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCXXC5標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。