CX3CR1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419886
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- CX3CR1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico CX3CR1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
CX3CR1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419886 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Cx3cr1 codifica CX3CR1, un receptor de quimiocinas de siete dominios transmembrana para CX3CL1 (fractalcina) que regula la adhesión de leucocitos, la quimiotaxis y la vigilancia tisular. En el ratón, CX3CR1 se expresa de forma destacada en monocitos/macrófagos, células dendríticas y microglía, vinculando la señalización de GPCR de quimiocinas con la remodelación del citoesqueleto, la activación de integrinas y programas transcripcionales inflamatorios. Las vías dependientes de CX3CR1 moldean la homeostasis microglial y la comunicación neuroinmunitaria, y también están implicadas en la inflamación vascular y el tráfico de células mieloides en tejidos periféricos. En consecuencia, Cx3cr1 se utiliza ampliamente como marcador y como nodo funcional en modelos de neuroinflamación, aterosclerosis y trastornos inflamatorios crónicos.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO CX3CR1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Cx3cr1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Cx3cr1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Cx3cr1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CX3CR1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Cx3cr1 para la investigación de la señalización de CX3CR1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Cx3cr1 críticos para la función de CX3CR1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Cx3cr1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido CX3CR1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido CX3CR1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Cx3cr1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CX3CR1 (m) y el plásmido HDR CX3CR1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Cx3cr1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Cx3cr1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.