CRM1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h2): sc-400348-KO-2

概要

XPO1は核外輸送受容体CRM1をコードしている。CRM1はカリオフェリンβファミリーに属するタンパク質で、ロイシンに富む核外輸送シグナル（NES）を認識し、RanGTP依存的にタンパク質および一部のRNAを核から細胞質へ輸送する。核‐細胞質間輸送を制御することで、CRM1は腫瘍抑制因子、転写因子、リボ核タンパク質複合体などのカーゴの局在を介して、細胞周期の進行、ストレス応答、転写プログラムを調節する。CRM1の機能はRan GTPアーゼサイクルおよび核膜孔複合体（NPC）の動態と連動し、区画化されたシグナル伝達とプロテオスタシスの維持に寄与する。XPO1/CRM1活性の異常やカーゴ分布の変化は、核‐細胞質輸送が攪乱されるがん生物学、抗ウイルス応答、神経変性の機序において、しばしば研究対象となっている。

CRM1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）は、human細胞株におけるXPO1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、XPO1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、XPO1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CRM1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CRM1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、XPO1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CRM1の機能に不可欠なXPO1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、XPO1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CRM1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCRM1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、XPO1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CRM1 HDRプラスミド（h）および CRM1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはXPO1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のXPO1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。