Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CPSF4 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-403190
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- CPSF4 Das CRISPR/Cas9-Knockout (KO)-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, von denen jedes für die Cas9-Nuklease und eine zielspezifische 20-nt-Guide-RNA (gRNA) kodiert, die für maximale Knockout-Effizienz unter Verwendung von Sequenzen aus der GeCKO v2-Bibliothek entwickelt wurde
- gRNA-Sequenzen lenken Cas9 so, dass es ortsspezifische Doppelstrangbrüche (DSBs) im CPSF4-Genomlokus induziert, was zu einem Gen-Knockout durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ) führt
- Die Puromycin-Resistenz- und RFP-Gene werden von LoxP-Stellen flankiert, was die Entfernung der Selektionsmarker mittels Cre-Rekombinase (Cre-Vektor: sc-418923) nach der Etablierung stabiler Knockout-Zelllinien ermöglicht
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: CPSF4: sc-393316
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
CPSF4 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) | sc-403190 | 20 µg | $397.00 |
Übersicht
CPSF4 (cleavage and polyadenylation specificity factor subunit 4) kodiert eine zentrale Komponente der mRNA-3′-Endverarbeitungsmaschinerie, die Polyadenylierungssignale erkennt und die Spaltung sowie die Anfügung des Poly(A)-Schwanzes koordiniert. Über seine Funktion im Cleavage-and-Polyadenylation-Komplex trägt CPSF4 zur Regulation der Transkriptreifung, der alternativen Polyadenylierung und der Genexpressionsausgabe bei und beeinflusst damit mRNA-Stabilität und Translation. Störungen von 3′-Endverarbeitungsfaktoren können die Nutzung von Poly(A)-Stellen verschieben und Transkriptionsnetzwerke breit umprogrammieren, wodurch CPSF4-assoziierte Biologie mit Zellzykluskontrolle, Stressantworten und Differenzierungsprogrammen verknüpft ist. Fehlregulierte RNA-Prozessierung und alternative Polyadenylierung werden häufig bei Krebs sowie in anderen proliferativen oder neuroentwicklungsbezogenen Kontexten beobachtet, was CPSF4 zu einem relevanten Ansatzpunkt für mechanistische Studien macht.
Das CPSF4 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des CPSF4-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des CPSF4-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.
Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von CPSF4 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die CPSF4-Proteinexpression aufheben.
Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von CPSF4-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der CPSF4-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.
Hauptmerkmale
- sgRNAs, die auf CPSF4-Exone abzielen, die für die CPSF4-Funktion entscheidend sind
Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
Pool von Plasmiden, die auf mehrere CPSF4-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion
Designvarianten
CRISPRs +/- HDRs
- gRNAs, die vom CPSF4 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom CPSF4 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des CPSF4-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das CPSF4 HDR-Plasmid (h) und CPSF4 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von CPSF4-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten CPSF4-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.