CPOX CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419785

概要

Cpoxは、ヘム生合成経路においてコプロポルフィリノーゲンIIIをプロトポルフィリノーゲンIXへ酸化的脱炭酸するミトコンドリア酵素、コプロポルフィリノーゲンオキシダーゼ（CPOX）をコードします。この段階は、ヘムタンパク質の組み立て、酸化的代謝、レドックス恒常性を支える細胞内ヘム供給に不可欠であり、とりわけ代謝活性の高い組織で重要です。ヘム経路酵素の機能障害は、ミトコンドリア機能を攪乱し、ポルフィリン中間体の蓄積を引き起こし、酸化ストレス応答を変化させる可能性があります。そのためCpoxは、ポルフィリン代謝、ミトコンドリア生物学、ならびにマウスモデルにおけるポルフィリン症様表現型の基盤機構に関する研究に関連します。

CPOX CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるCpox遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Cpox内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Cpoxのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CPOXタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CPOXシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Cpox欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CPOXの機能に不可欠なCpoxエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Cpoxゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CPOX CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびCPOX CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Cpox遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CPOX HDRプラスミド（m）および CPOX HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCpoxホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCpox標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。