COX11 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405874

Descripción general

COX11 codifica una proteína de la membrana interna mitocondrial necesaria para la biogénesis de la citocromo c oxidasa (complejo IV), y actúa como una metalochaperona de cobre que ayuda a entregar cobre al núcleo catalítico de COX1. A través de esta función, COX11 contribuye a la fosforilación oxidativa, el transporte de electrones y la producción celular de ATP, con efectos posteriores sobre el potencial de membrana mitocondrial y la homeostasis redox. La alteración del ensamblaje dependiente de COX11 puede reducir la capacidad respiratoria y promover cambios secundarios en la señalización de especies reactivas de oxígeno y en las respuestas al estrés metabólico. La función alterada del complejo IV y la proteostasis mitocondrial se estudian con frecuencia en el contexto de fenotipos neuromusculares y neurodegenerativos, así como de la remodelación metabólica en células cancerosas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO COX11 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen COX11 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del COX11 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de COX11 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína COX11.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en COX11 para la investigación de la señalización de COX11, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de COX11 críticos para la función de COX11
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de COX11 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido COX11 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido COX11 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus COX11. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR COX11 (h) y el plásmido HDR COX11 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología COX11 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana COX11 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.