Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
connexin 32 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402378-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- connexin 32O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase connexin 32 (h) e o Plasmídeo Double Nickase connexin 32 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GJB1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:connexin 32 Anticorpo (HAM8): sc-21794
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
connexin 32 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402378-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
connexin 32 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402378-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GJB1 codifica a conexina 32 (Cx32), uma proteína de canal de junção comunicante (gap junction) que forma condutos intercelulares para íons e pequenos metabólitos, permitindo o acoplamento elétrico e metabólico entre células vizinhas. A Cx32 é proeminente em células de Schwann mielinizantes e em outros tecidos epiteliais, onde contribui para a homeostase tecidual ao coordenar sinalização, equilíbrio redox e respostas a lesões. Por meio da regulação da comunicação intercelular via junções comunicantes, a conexina 32 influencia processos como excitabilidade de membrana, diferenciação celular e vias de sinalização de estresse. Alterações genéticas em GJB1 estão fortemente associadas a neuropatias periféricas hereditárias, tornando-o um alvo-chave para estudos mecanísticos sobre manutenção da mielina e defeitos de comunicação célula–célula.
connexin 32 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GJB1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GJB1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GJB1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GJB1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.