connexin 31.9 Plasmide Double Nickase (m2): sc-436134-NIC-2
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- connexin 31.9 Plasmide Double Nickase (m2) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il connexin 31.9 Double Nickase Plasmid (m2) e il connexin 31.9 Double Nickase Plasmid (m22) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Gjd3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
connexin 31.9 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-436134-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino **Gjd3** codifica la **connexina 31.9**, una proteina delle giunzioni gap che si assembla in connexoni per consentire la comunicazione intercellulare diretta attraverso lo scambio di ioni e piccoli metaboliti. L’accoppiamento dipendente dalle connexine contribuisce all’omeostasi tissutale coordinando la segnalazione elettrica e metabolica, influenzando processi come proliferazione, differenziamento e risposte allo stress. Alterazioni dell’espressione delle connexine o della funzione dei canali sono associate a una disregolazione della segnalazione cellula-cellula e sono state studiate in contesti che includono l’integrità della barriera epiteliale, l’infiammazione e la biologia dei tumori, rendendo **Gjd3** un bersaglio utile per indagare il contributo delle vie delle giunzioni gap alla fisiologia e a fenotipi rilevanti per la malattia.
connexin 31.9 Il plasmide Double Nickase (m2) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Gjd3 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Gjd3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Gjd3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Gjd3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.