CLEC-3A Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-417520

Descripción general

CLEC3A codifica CLEC-3A, una proteína secretada que contiene un dominio de lectina tipo C e implicada en la organización de la matriz extracelular y en la comunicación célula–matriz. CLEC-3A se ha vinculado con la modulación de las interacciones del colágeno y con procesos de remodelación tisular que se solapan con la adhesión, la migración y la señalización del microambiente inflamatorio. En tejidos humanos, se han descrito alteraciones en la expresión de CLEC3A en contextos de fibrosis, reparación de heridas y estroma asociado a tumores, lo que respalda su uso como marcador y como nodo mecanístico en fenotipos impulsados por la remodelación. Estas propiedades hacen que CLEC3A sea relevante para estudiar cómo las proteínas tipo lectina moldean señales extracelulares que influyen en el comportamiento epitelio–mesénquima y en el tráfico de células inmunitarias.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO CLEC-3A (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CLEC3A en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CLEC3A junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CLEC3A tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CLEC-3A.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CLEC3A para la investigación de la señalización de CLEC-3A, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de CLEC3A críticos para la función de CLEC-3A
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CLEC3A para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido CLEC-3A CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido CLEC-3A CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CLEC3A. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CLEC-3A (h) y el plásmido HDR CLEC-3A (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CLEC3A para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CLEC3A definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.