Plásmido Doble Nickase (h) claudin-6: sc-403405-NIC

El gen humano **CLDN6** codifica la claudina-6, un componente transmembrana de cuatro pasos de las hebras de las uniones estrechas que regula la permeabilidad paracelular y la integridad de la barrera epitelial. La claudina-6 participa en la organización del complejo de unión y en programas de polaridad mediante interacciones con proteínas andamiaje como miembros de la familia ZO, conectando la arquitectura de membrana con la dinámica del citoesqueleto. Su expresión está regulada durante el desarrollo y a menudo se asocia con estados de diferenciación epitelial, lo que convierte a **CLDN6** en un marcador útil para estudios de linaje y estado celular. La señalización alterada de las uniones estrechas y los patrones modificados de expresión de claudinas se han implicado ampliamente en la remodelación epitelial y en cambios asociados a tumores en adhesión, invasión y función de barrera, lo que respalda la investigación de **CLDN6** en modelos relevantes para enfermedad.

claudin-6 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CLDN6 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CLDN6. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CLDN6. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CLDN6 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.