CEACAM1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-417666

Descripción general

CEACAM1 (molécula de adhesión celular 1 relacionada con el antígeno carcinoembrionario) es una glucoproteína de superficie celular de la superfamilia de las inmunoglobulinas que media la adhesión homofílica y heterofílica en interfaces epiteliales y endoteliales. A través de sus motivos ITIM citoplasmáticos, CEACAM1 modula la señalización dependiente de fosfatasas para influir en la salida de las vías MAPK y PI3K/AKT, la organización del citoesqueleto y la integridad de las uniones celulares. También funciona como un receptor regulador inmunitario en leucocitos, ajustando los umbrales de activación y las respuestas de citocinas en microambientes inflamatorios. La expresión desregulada de CEACAM1 y el equilibrio de sus isoformas se han asociado con alteraciones de la función de barrera, evasión inmunitaria, remodelación angiogénica y fenotipos de progresión en múltiples tumores sólidos y enfermedades inflamatorias.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO CEACAM1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CEACAM1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CEACAM1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CEACAM1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CEACAM1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CEACAM1 para la investigación de la señalización de CEACAM1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de CEACAM1 críticos para la función de CEACAM1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CEACAM1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido CEACAM1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido CEACAM1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CEACAM1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CEACAM1 (h) y el plásmido HDR CEACAM1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CEACAM1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CEACAM1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.