CDKN2C/p18 INK4c Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401214

Descripción general

CDKN2C codifica p18 INK4c, un miembro de la familia INK4 de inhibidores de quinasas dependientes de ciclinas que se une a CDK4 y CDK6 para restringir la fosforilación de RB impulsada por ciclina D y hacer cumplir el punto de control G1/S. Al limitar los programas transcripcionales dependientes de E2F, CDKN2C contribuye al control de la progresión del ciclo celular, el compromiso de linaje y la quiescencia celular en múltiples tejidos. La alteración de la función de CDKN2C se estudia con frecuencia en el contexto de la desregulación de la señalización CDK4/6–RB, la inestabilidad genómica y fenotipos proliferativos relevantes para la biología del cáncer. CDKN2C también se utiliza como un nodo mecanístico para conectar las entradas de señalización mitogénica con la integridad de los puntos de control en modelos de estrés oncogénico.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO CDKN2C/p18 INK4c (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CDKN2C en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CDKN2C junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CDKN2C tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CDKN2C/p18 INK4c.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CDKN2C para la investigación de la señalización de CDKN2C/p18 INK4c, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de CDKN2C críticos para la función de CDKN2C/p18 INK4c
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CDKN2C para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido CDKN2C/p18 INK4c CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido CDKN2C/p18 INK4c CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CDKN2C. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CDKN2C/p18 INK4c (h) y el plásmido HDR CDKN2C/p18 INK4c (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CDKN2C para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CDKN2C definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.