Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Cdc37 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419584
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Cdc37 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Cdc37, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Cdc37 Anticuerpo (E-4): sc-13129
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Cdc37 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419584 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Cdc37 (ciclo de división celular 37) codifica una cochaperona conservada de HSP90 que estabiliza y promueve la maduración de un amplio conjunto de quinasas de proteínas, incluidos muchos reguladores de las vías de señalización MAPK y PI3K–AKT. Al coordinar el plegamiento de quinasas, el ensamblaje de complejos y la proteostasis, CDC37 influye en la progresión del ciclo celular, las respuestas al estrés y la robustez de las redes de señalización. La alteración de la función de CDC37 puede remodelar los paisajes de señalización por fosforilación y modificar la dependencia de las vías de chaperonas, lo que lo hace relevante para estudios de fenotipos celulares impulsados por quinasas y del desequilibrio de la proteostasis. Por ello, el Cdc37 de ratón se utiliza ampliamente para investigar los circuitos chaperona–quinasa en el desarrollo, la homeostasis tisular y modelos de señalización relevantes para enfermedades.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Cdc37 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Cdc37 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Cdc37 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Cdc37 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Cdc37.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Cdc37 para la investigación de la señalización de Cdc37, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Cdc37 críticos para la función de Cdc37
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Cdc37 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Cdc37 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Cdc37 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Cdc37. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Cdc37 (m) y el plásmido HDR Cdc37 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Cdc37 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Cdc37 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.