Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CD97 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h2): sc-404492-KO-2
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- CD97 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h2) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico CD97, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CD97 Anticuerpo (G-8): sc-166852
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
CD97 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h2) | sc-404492-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
ADGRE5 codifica CD97, un receptor de adhesión acoplado a proteína G expresado de forma prominente en leucocitos, que media interacciones célula–célula y célula–matriz. CD97 sufre un procesamiento autoproteolítico y señaliza a través de proteínas G heterotriméricas para influir en la remodelación del citoesqueleto, la migración y el posicionamiento de las células inmunitarias, integrando señales de componentes de la matriz extracelular y de proteínas reguladoras del complemento. Por sus funciones en la adhesión y el tráfico leucocitario, CD97 contribuye a la dinámica del microambiente inflamatorio y se ha estudiado en contextos de desregulación inmunitaria e interacciones tumor–inmunidad. Su actividad vincula la señalización dependiente de la adhesión con vías downstream que modelan la quimiotaxis, la infiltración tisular y la comunicación intercelular.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO CD97 (h2) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ADGRE5 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ADGRE5 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ADGRE5 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CD97.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ADGRE5 para la investigación de la señalización de CD97, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de ADGRE5 críticos para la función de CD97
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ADGRE5 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido CD97 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido CD97 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ADGRE5. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CD97 (h) y el plásmido HDR CD97 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ADGRE5 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ADGRE5 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.