CD97 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h2): sc-404492-KO-2

概要

ADGRE5はCD97をコードしており、CD97は白血球に高発現する接着性のGタンパク質共役型受容体（GPCR）で、細胞—細胞および細胞—マトリックス間相互作用を媒介します。CD97は自己プロテオリシスによるプロセシングを受け、三量体Gタンパク質を介してシグナルを伝達することで、細胞骨格の再構築、遊走、免疫細胞の局在制御に影響を与えます。これにより、細胞外マトリックス成分や補体制御タンパク質からの情報を統合します。接着と白血球トラフィッキングに関わる機能を通じて、CD97は炎症性微小環境のダイナミクスに寄与し、免疫調節異常や腫瘍—免疫相互作用の文脈で研究されています。その活性は、接着依存的なシグナル伝達を、走化性、組織浸潤、細胞間コミュニケーションを形作る下流経路へと結び付けます。

CD97 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）は、human細胞株におけるADGRE5遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ADGRE5内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ADGRE5のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CD97タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CD97シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ADGRE5欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CD97の機能に不可欠なADGRE5エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ADGRE5ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CD97 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCD97 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ADGRE5遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CD97 HDRプラスミド（h）および CD97 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはADGRE5ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のADGRE5標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。