CD79B CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-421055

Übersicht

Cd79b kodiert CD79B (Igβ), eine essenzielle Signaleinheit des B‑Zell-Antigenrezeptor-(BCR)-Komplexes, die mit CD79A zusammenwirkt, um die Bindung von Oberflächen-Immunglobulinen an intrazelluläre Signalübertragung zu koppeln. Über sein ITAM-Motiv koordiniert CD79B die Rekrutierung von Kinasen und Adapterproteinen, um BCR-abhängige Signalwege weiterzuleiten, die die B‑Zell-Entwicklung, Aktivierung, Antigenprozessierung und das Überleben regulieren. Die Funktion von CD79B ist eng mit nachgeschalteten Kaskaden verknüpft, darunter SYK/BTK-vermittelte Signalgebung sowie die Aktivierung der NF‑κB- und MAPK-Signalwege, wodurch Immunantworten und Toleranz geprägt werden. Fehlregulierte BCR-Signalgebung sowie veränderte CD79B-Expression oder -Funktion werden häufig im Kontext von Mechanismen B‑zellulärer Malignome und immunologischer Dysregulation untersucht, was Cd79b zu einem nützlichen Lokus macht, um B‑Zell-Signalnetzwerke zu analysieren.

Das CD79B CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Cd79b-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Cd79b-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Cd79b nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die CD79B-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Cd79b-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der CD79B-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Cd79b-Exone abzielen, die für die CD79B-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Cd79b-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom CD79B CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom CD79B CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Cd79b-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das CD79B HDR-Plasmid (m) und CD79B HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Cd79b-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Cd79b-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.