CD79B CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421055

概要

Cd79b は、B 細胞抗原受容体（BCR）複合体の必須シグナル伝達サブユニットである CD79B（Igβ）をコードしており、CD79A と対をなして、細胞表面免疫グロブリンの抗原結合を細胞内シグナルへと結び付けます。CD79B は ITAM モチーフを介してキナーゼやアダプタータンパク質のリクルートを統括し、BCR 依存性経路を伝播させることで、B 細胞の発生、活性化、抗原処理、生存を調節します。CD79B の機能は SYK/BTK を介するシグナル伝達や NF-κB・MAPK 経路の活性化などの下流カスケードと密接に関連しており、免疫応答と免疫寛容の形成に影響を与えます。BCR シグナルの破綻や CD79B の発現・機能の変化は、B 細胞性悪性腫瘍の機序や免疫調節異常の文脈でしばしば研究対象となるため、Cd79b は B 細胞シグナル伝達ネットワークを解析するうえで有用な遺伝子座です。

CD79B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるCd79b遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Cd79b内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Cd79bのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CD79Bタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CD79Bシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Cd79b欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CD79Bの機能に不可欠なCd79bエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Cd79bゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CD79B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびCD79B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Cd79b遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CD79B HDRプラスミド（m）および CD79B HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCd79bホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCd79b標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。