CD79A CRISPR Activationプラスミド (h): sc-401827-ACT

CD79Aは、B細胞抗原受容体（BCR）複合体のIg-αサブユニットをコードしており、CD79Bと対になって、抗原認識を細胞内シグナル伝達へ結び付けます。免疫受容体チロシンベース活性化モチーフ（ITAM）はリン酸化されることでSYK依存性カスケードを開始し、PI3K–AKT、BTK、NF-κB、MAPK経路を作動させ、B細胞の活性化・増殖・生存を規定します。CD79Aの発現はB細胞系譜の同一性と密接に関連し、発生および分化の過程における抗原駆動性の選択にも影響します。BCRシグナルの破綻やCD79A活性の変化は、B細胞由来の免疫機能異常や血液疾患の病態に関与するとされ、免疫学・腫瘍学研究における機序的マーカーとしての利用を支持します。

CD79A CRISPR活性化プラスミド（h）は、基盤となるDNA配列を変更することなく、内因性CD79Aの発現を標的化し、非破壊的にアップレギュレートするアプローチを提供します。

CD79A CRISPR 活性化プラスミド (h) は、ヒト細胞株における CD79A 遺伝子座の高効率かつ部位特異的な転写アップレギュレーションのために設計された、3 つのプラスミドからなる相乗的活性化メディエーター (SAM) システムです。このシステムは、DNA結合能を維持しつつヌクレアーゼ活性を失わせる2つの不活性化変異（D10AおよびN863A）を有する、触媒活性のないCas9（dCas9）を中核としています。このdCas9は、強力な転写活性化因子であるVP64と融合しており、選別用のブラスティシジン耐性遺伝子と共に共発現します。2番目のプラスミドは、dCas9-VP64と協調して機能する二次活性化複合体であるMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードしており、ヒグロマイシン耐性遺伝子と共に発現する。3番目のプラスミドは、標的特異的な20塩基対のsgRNAをコードしており、これはMS2-p65-HSF1複合体を活性化部位に誘導する2つのMS2 RNAアプタマーと融合しており、さらにピューロマイシン耐性遺伝子が付随している。これら3つのプラスミドは、システム構成要素すべてが均等に発現するよう、質量比1:1:1で導入される。

標的遺伝子座に集合すると、SAM複合体はCD79A転写開始点の上流約200 bpの領域に結合し、そこでVP64、p65、およびHSF1が協調して転写装置を動員し、内因性CD79Aの発現上昇を促進する。ヌクレアーゼ活性を持つCas9とは異なり、 dCas9は二本鎖切断を導入したりゲノム配列を改変したりしないため、天然のCD79A遺伝子座が保持され、内因性遺伝子座におけるCD79A依存性の転写応答の研究が可能となります。これにより、機能解析、標的遺伝子の同定、およびCD79A発現が沈黙または低下した腫瘍細胞におけるCD79A経路の回復のモデル化を行う上で、貴重なツールとなります。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。