Plásmido Doble Nickase (m) CD71/TFRC/Transferrin Receptor: sc-423504-NIC

El gen **Tfrc** de ratón codifica **CD71/TFRC**, un receptor transmembrana de tipo II que se une a la transferrina y media la endocitosis dependiente de clatrina del ligando cargado con hierro para facilitar la entrega de hierro al interior de la célula. Al regular la captación celular de hierro y la señalización sensible al hierro, **TFRC** influye en la síntesis de hemo, la respiración mitocondrial, la replicación del ADN y la homeostasis del estrés oxidativo, y su expresión está estrechamente ligada al estado proliferativo. **CD71** es destacado en células de rápida división y en linajes inmunitarios donde la demanda de hierro es alta, conectando la biología de **TFRC** con la activación de linfocitos, la eritropoyesis y la reprogramación metabólica. La alteración del manejo del hierro y los cambios en la expresión de **TFRC** se estudian con frecuencia en contextos como la anemia, la inflamación, la neurodegeneración y el metabolismo del hierro asociado a tumores.

CD71/TFRC/Transferrin Receptor El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Tfrc en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Tfrc. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Tfrc. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Tfrc alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.