Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
CD53 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419561
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- CD53 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico CD53, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CD53 Anticuerpo (B-12): sc-390185
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
CD53 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419561 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Cd53 codifica CD53, una glucoproteína de superficie celular de la familia de las tetraspaninas, enriquecida en leucocitos, que ayuda a organizar microdominios de membrana y a coordinar la señalización de receptores. CD53 participa en la adhesión, migración y activación de células inmunitarias al modular la función de las integrinas y asociarse con complejos de señalización que influyen en la remodelación del citoesqueleto y en vías de quinasas aguas abajo. En modelos murinos, los patrones de expresión y la función de CD53 están estrechamente vinculados a las respuestas de células B y T, la presentación de antígenos y redes de señalización inflamatoria. La organización desregulada de tetraspaninas, incluidas las interacciones dependientes de CD53 alteradas, se estudia con frecuencia en contextos de disfunción inmunitaria y biología de células hematopoyéticas.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO CD53 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Cd53 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Cd53 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Cd53 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CD53.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Cd53 para la investigación de la señalización de CD53, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Cd53 críticos para la función de CD53
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Cd53 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido CD53 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido CD53 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Cd53. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CD53 (m) y el plásmido HDR CD53 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Cd53 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Cd53 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.