CD36 Double Nickaseプラスミド (m): sc-419545-NIC
- 対象生物種: mouse
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- CD36 Double Nickaseプラスミド (m)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- CD36ダブルニカースプラスミド（m）およびCD36ダブルニカースプラスミド（m2）は、Cd36を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: CD36 抗体 (SMφ): sc-7309
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
CD36 Double Nickaseプラスミド (m) | sc-419545-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD36 Double Nickaseプラスミド (m2) | sc-419545-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
マウスCd36は、多機能性のスカベンジャー受容体であるCD36をコードしており、長鎖脂肪酸、酸化リン脂質、ならびにリポタンパク質に結合したリガンドに結合して、脂質の取り込みと細胞内輸送を制御します。CD36の活性は脂肪酸輸送や代謝シグナル伝達と統合的に連動し、脂肪組織、筋肉、肝臓、免疫系コンパートメントなどの組織において、ミトコンドリアの基質利用や脂質滴の動態に影響を与えます。マクロファージや内皮細胞では、CD36は修飾リポタンパク質の取り込みおよびクリアランス経路に関与し、炎症応答や酸化ストレスの形成に影響します。Cd36の発現や機能の破綻は、代謝恒常性の破綻、インスリン抵抗性、脂肪肝表現型、動脈硬化病変の生物学、ならびに腫瘍微小環境における栄養感知のモデルで広く研究されています。
CD36 ダブルニカースプラスミド（m）は、mouse 細胞株における Cd36 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、Cd36内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、Cd36の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、Cd36が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。