Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CCZ1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-417084
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- CCZ1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico CCZ1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CCZ1 Anticuerpo (B-7): sc-514290
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
CCZ1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-417084 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
CCZ1B codifica la proteína CCZ1, un componente central del complejo factor de intercambio de nucleótidos de guanina CCZ1–MON1, que activa a RAB7 para coordinar la maduración de los endosomas tardíos y la fusión endosoma–lisosoma. Mediante la regulación del tráfico de membranas dependiente de RAB7, CCZ1 favorece la entrega a los lisosomas y el recambio de receptores y carga internalizados, influyendo en el flujo de autofagia–lisosoma y en la proteostasis celular. La alteración de esta vía puede desestabilizar la homeostasis de los orgánulos, modificar la atenuación de receptores de señalización y afectar las respuestas al estrés metabólico y proteotóxico. En consecuencia, CCZ1B es de interés en estudios de neurodegeneración, adaptación de células cancerosas y función de células inmunitarias, donde el tráfico endolisosomal y la autofagia se remodelan con frecuencia.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO CCZ1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CCZ1B en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CCZ1B junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CCZ1B tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CCZ1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CCZ1B para la investigación de la señalización de CCZ1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de CCZ1B críticos para la función de CCZ1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CCZ1B para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido CCZ1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido CCZ1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CCZ1B. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CCZ1 (h) y el plásmido HDR CCZ1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CCZ1B para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CCZ1B definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.