Partículas Lentivirales de Activación (m) CCDC69: sc-424629-LAC

El gen murino **Ccdc69** codifica **CCDC69**, una proteína que contiene un dominio *coiled-coil* implicada en la organización del citoesqueleto y la progresión mitótica, con vínculos descritos con procesos asociados al centrosoma y al huso mitótico que ayudan a mantener la estabilidad del genoma. Las proteínas de andamiaje *coiled-coil* suelen coordinar el ensamblaje de complejos multiproteicos que regulan la dinámica de los microtúbulos, la señalización de los puntos de control y la remodelación dependiente del ciclo celular. La regulación alterada de estas vías puede influir en la proliferación, la aneuploidía y las respuestas al estrés, lo que hace que **Ccdc69** sea de interés para estudiar mecanismos que conectan la fidelidad de la división con una homeostasis celular más amplia. En sistemas de modelos murinos, la modulación de la expresión de **Ccdc69** permite investigar efectos a nivel de vías sobre el control del ciclo celular y fenotipos relacionados relevantes para enfermedades, sin implicar resultados clínicos.

Las partículas de activación lentiviral CCDC69 (m) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de Ccdc69 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral CCDC69 (m) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción Ccdc69, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de CCDC69. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo Ccdc69 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.