CBX7 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-424634

Descripción general

Cbx7 codifica la proteína homóloga 7 de chromobox (CBX7), un lector de H3K27me3 que contiene un cromodominio y que actúa como componente central del complejo represor de Polycomb 1 (PRC1) para mantener un silenciamiento transcripcional estable. En células de ratón, CBX7 contribuye al control epigenético del compromiso de linaje, la regulación del ciclo celular y la senescencia al promover la compactación de la cromatina y la represión de loci del desarrollo y de supresores tumorales. La actividad de Polycomb dependiente de CBX7 se entrecruza con programas de diferenciación y redes de autorrenovación de células madre, moldeando estados de expresión génica a largo plazo. La desregulación de la represión mediada por Polycomb, incluida la alteración de la función de CBX7, se estudia ampliamente en la oncogénesis, los fenotipos asociados al envejecimiento y los trastornos del desarrollo como un mecanismo de regulación aberrante de la cromatina.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO CBX7 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Cbx7 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Cbx7 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Cbx7 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CBX7.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Cbx7 para la investigación de la señalización de CBX7, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Cbx7 críticos para la función de CBX7
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Cbx7 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido CBX7 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido CBX7 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Cbx7. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CBX7 (m) y el plásmido HDR CBX7 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Cbx7 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Cbx7 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.