CA XIV Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404085-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CA XIVO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CA XIV (h) e o Plasmídeo Double Nickase CA XIV (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CA14. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CA XIV Anticorpo (A-4): sc-166438
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CA XIV Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404085-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CA XIV Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404085-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene humano **CA14** codifica a anidrase carbônica XIV (CA XIV), uma metaloenzima de zinco ancorada à membrana que catalisa a hidratação reversível do CO₂ em bicarbonato e prótons, dando suporte ao controle do pH extracelular e ao transporte de bicarbonato. Ao se acoplar a transportadores iônicos e a sistemas tampão, a CA XIV contribui para a homeostase ácido-base que molda o fluxo metabólico, a fisiologia epitelial e a excitabilidade neuronal. A expressão de **CA14** e a atividade da CA XIV têm sido associadas a processos que dependem de regulação precisa do pH, incluindo a sinalização célula–célula e a acidificação do microambiente relevante para a biologia tumoral e o remodelamento tecidual. Assim, a atividade desregulada de anidrases carbônicas é estudada em relação às dinâmicas de pH alteradas observadas em diversos distúrbios neurológicos e epiteliais e em cânceres.
CA XIV O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CA14 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CA14. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CA14. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CA14 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.