Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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BVES Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403698
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- BVES El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico BVES, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: BVES Anticuerpo (E-3): sc-374081
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
BVES Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403698 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
La sustancia epicárdica de los vasos sanguíneos (BVES), también conocida como POPDC1, es una proteína asociada a la membrana enriquecida en el músculo estriado y los tejidos epiteliales que contribuye a la adhesión célula–célula y a la polaridad epitelial. BVES participa en redes de señalización vinculadas a la unión de AMPc, el tráfico de membranas y la organización del citoesqueleto, ayudando a coordinar la integridad de las uniones y la arquitectura tisular. La alteración de la expresión o la localización de BVES se ha asociado con una función de barrera comprometida y una migración celular aberrante, lo que la hace relevante para estudios de las transiciones epitelio‑mesénquima y la remodelación tisular. En biología del cáncer y en investigación cardiovascular, BVES se examina con frecuencia por sus funciones en el mantenimiento de la organización celular normal y en vías que influyen en la proliferación y la motilidad.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO BVES (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen BVES en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del BVES junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de BVES tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína BVES.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en BVES para la investigación de la señalización de BVES, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de BVES críticos para la función de BVES
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de BVES para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido BVES CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido BVES CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus BVES. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR BVES (h) y el plásmido HDR BVES (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología BVES para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana BVES definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.