BMP2K CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-405196

Übersicht

BMP2K (BMP-2-induzierbare Kinase) kodiert eine Serin/Threonin-Kinase, die an intrazellulärem Transport und Membrandynamik beteiligt ist. Es wurden Funktionen bei der clathrinvermittelten Endozytose und der Regulation von Adaptorprotein-Komplexen beschrieben. Seine Aktivität wird mit der Modulation der erythroiden Reifung und zellulärer Differenzierungsprogramme in Verbindung gebracht, was zu BMP-responsiven Signalkontexten passt. BMP2K-assoziierte Phosphorylierungsereignisse können die Rezeptorinternalisierung und die Stärke nachgeschalteter Signale beeinflussen und verknüpfen BMP2K damit mit breiteren Netzwerken, die Proliferation und Stressantworten steuern. Fehlregulierte endozytotische und Differenzierungspfade, an denen BMP2K beteiligt ist, wurden in Studien zu hämatologischen Phänotypen und zur krebsassoziierten Umverdrahtung von Signalwegen untersucht.

Das BMP2K CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des BMP2K-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des BMP2K-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von BMP2K nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die BMP2K-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von BMP2K-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der BMP2K-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf BMP2K-Exone abzielen, die für die BMP2K-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere BMP2K-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom BMP2K CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom BMP2K CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des BMP2K-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das BMP2K HDR-Plasmid (h) und BMP2K HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von BMP2K-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten BMP2K-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.