BCLAF1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-428381

Descripción general

Bclaf1 codifica BCLAF1, un factor nuclear de unión a ADN y ARN implicado en la regulación transcripcional, el empalme (splicing) del pre-ARNm y el control de la expresión génica asociado a la cromatina. BCLAF1 se ha relacionado con respuestas al daño del ADN y programas vinculados a la apoptosis mediante interacciones con la señalización de la familia BCL2 y redes transcripcionales sensibles al estrés. En células de ratón, BCLAF1 contribuye al mantenimiento de la estabilidad del genoma y a la regulación de vías del ciclo celular y de supervivencia que moldean la expresión génica relevante para el desarrollo y el sistema inmunitario. La actividad desregulada de BCLAF1 se ha asociado con una capacidad proliferativa alterada y fenotipos aberrantes de procesamiento de ARN relevantes para la biología del cáncer y contextos de señalización neuroinmunitaria.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO BCLAF1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Bclaf1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Bclaf1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Bclaf1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína BCLAF1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Bclaf1 para la investigación de la señalización de BCLAF1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Bclaf1 críticos para la función de BCLAF1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Bclaf1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido BCLAF1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido BCLAF1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Bclaf1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR BCLAF1 (m) y el plásmido HDR BCLAF1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Bclaf1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Bclaf1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.