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B7-1双切口酶质粒(h) | sc-401971-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
B7-1双切口酶质粒(h2) | sc-401971-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CD80(B7-1)是一种可诱导表达的免疫球蛋白超家族共刺激配体,主要表达于抗原呈递细胞表面,可与 CD28 和 CTLA-4 结合,从而调控 T 细胞的激活、增殖与耐受。CD80 通过与 TCR 信号整合,影响下游 PI3K–AKT、NF-κB 以及细胞因子转录等程序,进而塑造适应性免疫应答。CD80 表达失调与多种炎症及自身免疫状态中观察到的免疫检查点平衡改变和异常抗原呈递相关,并且常在肿瘤—免疫相互作用研究中被重点关注。作为一种受体生物学明确的表面标志物,CD80 常用于在人源细胞模型中解析 APC 成熟过程、共刺激阈值以及免疫突触的形成。
B7-1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CD80 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CD80内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CD80的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CD80基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。