AZ1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406801
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- AZ1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico AZ1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
AZ1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406801 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El gen humano OAZ1 codifica la antizima 1 (AZ1), un regulador negativo clave del metabolismo de las poliaminas que limita las concentraciones intracelulares de putrescina, espermidina y espermina al unirse a la ornitina descarboxilasa (ODC) y promover su degradación proteasomal independiente de ubiquitina. Al restringir la biosíntesis y el transporte de poliaminas, AZ1 influye en procesos fundamentales como la progresión del ciclo celular, la traducción y programas de crecimiento adaptativos frente al estrés. La expresión de OAZ1 está estrictamente controlada por un cambio de marco de lectura ribosomal +1 sensible a poliaminas, formando un circuito de retroalimentación que estabiliza la homeostasis de poliaminas. La desregulación del control de poliaminas que involucra a OAZ1 se ha asociado con estados de señalización proliferativa y dependencias metabólicas alteradas observadas en el cáncer y otras patologías relacionadas con el crecimiento.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO AZ1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen OAZ1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del OAZ1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de OAZ1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína AZ1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en OAZ1 para la investigación de la señalización de AZ1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de OAZ1 críticos para la función de AZ1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de OAZ1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido AZ1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido AZ1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus OAZ1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR AZ1 (h) y el plásmido HDR AZ1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología OAZ1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana OAZ1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.