ARG1/Arginase 1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (bovine): sc-437305

Übersicht

ARG1/Arginase 1 kodiert eine manganabhängige Ureohydrolase, die die Umwandlung von L-Arginin zu Harnstoff und Ornithin katalysiert. Das Enzym fungiert als zentrales terminales Enzym des Harnstoffzyklus und als Regulator der Stickstoffausscheidung. Durch die Kontrolle der Arginin-Bioverfügbarkeit beeinflusst ARG1 über Ornithin die Polyamin- und Prolinbiosynthese, verknüpft den Aminosäurestoffwechsel mit der Kollagenproduktion und moduliert die Stickstoffmonoxid-(NO-)Signalübertragung durch Konkurrenz mit NO-Synthasen. In bovinen Systemen ist die ARG1-Aktivität relevant für die metabolische Homöostase der Leber sowie für immunmetabolische Programme in myeloiden Zellen, in denen der Argininabbau den Entzündungsstatus und die Gewebeumbauprozesse mitprägen kann. Eine fehlregulierte, arginasegetriebene Argininverarmung wurde mit beeinträchtigten Immun-Effektorfunktionen und veränderten Antworten auf metabolischen Stress in Verbindung gebracht, was mechanistische Studien in Leber- und Immunmodellen unterstützt.

Das ARG1/Arginase 1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (bovine) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des -Gens in bovine-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des -Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die ARG1/Arginase 1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von -defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der ARG1/Arginase 1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf -Exone abzielen, die für die ARG1/Arginase 1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere -Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom ARG1/Arginase 1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (bovine) und vom ARG1/Arginase 1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (bovine2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des -Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das ARG1/Arginase 1 HDR-Plasmid (bovine) und ARG1/Arginase 1 HDR-Plasmid (bovine2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von -Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten -Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.