ARG1/Arginase 1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (bovine): sc-437305

概要

ARG1／アルギナーゼ1は、マンガン依存性の尿素加水分解酵素をコードし、L-アルギニンを尿素とオルニチンへ変換します。尿素回路における主要な末端酵素として機能するとともに、窒素排泄の調節因子でもあります。ARG1はアルギニンの生物学的利用能を制御することで、オルニチンを介したポリアミンおよびプロリン生合成に影響し、アミノ酸代謝をコラーゲン産生へ結び付けます。また、一酸化窒素合成酵素（NOS）との競合を通じて一酸化窒素（NO）シグナル伝達を調節します。ウシの系においては、ARG1活性は肝臓の代謝恒常性に関与するほか、骨髄系細胞における免疫代謝プログラムにも関連しており、アルギニン分解が炎症の強さや組織リモデリングの方向性を左右し得ます。アルギナーゼによるアルギニン枯渇が制御不能になると、免疫エフェクター機能の低下や代謝ストレス応答の変化と関連することが報告されており、肝臓および免疫モデルでの機序解明研究を支持します。

ARG1/Arginase 1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（bovine）は、bovine細胞株における遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ARG1/Arginase 1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ARG1/Arginase 1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ARG1/Arginase 1の機能に不可欠なエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ARG1/Arginase 1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（bovine）およびARG1/Arginase 1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（bovine2）によってコードされるgRNAは、遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ARG1/Arginase 1 HDRプラスミド（bovine）および ARG1/Arginase 1 HDRプラスミド（bovine2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定の標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。