Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Arg Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-418936
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Arg El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Arg, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Arg Anticuerpo (1H1B11): sc-81154
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Arg Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-418936 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El gen Abl2 de ratón codifica la tirosina quinasa no receptora Arg, un parálogo cercano de ABL1 que integra señales de receptores de factores de crecimiento y de complejos de adhesión para controlar la remodelación del citoesqueleto de actina. Arg regula procesos celulares como la migración, el crecimiento de neuritas, la endocitosis y las respuestas al estrés oxidativo y mecánico, al acoplar eventos de fosforilación con la señalización de GTPasas de la familia Rho y de las adhesiones focales. Por sus funciones en la dinámica del citoesqueleto y en las interacciones célula–célula/célula–matriz, Arg se estudia con frecuencia en el contexto de comportamientos celulares invasivos y de señalización quinasa aberrante. La actividad desregulada de la familia ABL y las vías dependientes de Abl2 alteradas se han vinculado a fenotipos oncogénicos y a disfunción neurobiológica en modelos experimentales.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Arg (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Abl2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Abl2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Abl2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Arg.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Abl2 para la investigación de la señalización de Arg, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Abl2 críticos para la función de Arg
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Abl2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Arg CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Arg CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Abl2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Arg (m) y el plásmido HDR Arg (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Abl2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Abl2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.