apoC-IV CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-418944

Übersicht

Apoc4 kodiert Apolipoprotein C-IV (apoC-IV), ein sezerniertes Apolipoprotein, das hauptsächlich mit zirkulierenden Lipoproteinpartikeln assoziiert ist und am Lipidtransport sowie am Remodeling von Lipoproteinen beteiligt ist. In der Maus ist apoC-IV mit der Regulation des Stoffwechsels triglyceridreicher Lipoproteine verknüpft und greift in Signalwege ein, die die Aktivität der Lipoproteinlipase, den hepatischen Lipidumsatz und den Lipidaustausch zwischen VLDL-/IDL-/HDL-Fraktionen steuern. Variationen in der Apolipoproteinzusammensetzung können die systemische Energiebilanz und inflammatorische Signalgebung indirekt beeinflussen, indem sie den Lipidfluss und lipidabgeleitete Mediatoren verändern. Damit ist Apoc4 relevant für Studien zu Mechanismen der Dyslipidämie, kardiometabolischen Phänotypen und der leberzentrierten Lipidhomöostase in physiologischen sowie krankheitsmodellbasierten Kontexten.

Das apoC-IV CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Apoc4-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Apoc4-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Apoc4 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die apoC-IV-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Apoc4-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der apoC-IV-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Apoc4-Exone abzielen, die für die apoC-IV-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Apoc4-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom apoC-IV CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom apoC-IV CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Apoc4-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das apoC-IV HDR-Plasmid (m) und apoC-IV HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Apoc4-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Apoc4-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.