apoC-III Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419165
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- apoC-III El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico apoC-III, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
apoC-III Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419165 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El gen Apoc3 de ratón codifica la apolipoproteína C-III (apoC-III), una pequeña apolipoproteína secretada que modula la homeostasis de los triglicéridos en el plasma al regular el metabolismo y la depuración de las lipoproteínas ricas en triglicéridos. La apoC-III influye en la lipólisis dependiente de la lipoproteína lipasa y en las vías de captación hepática, determinando el manejo de las VLDL y de los remanentes de quilomicrones, así como el flujo lipídico posterior. A través de estos procesos, la actividad de Apoc3 se relaciona con el equilibrio energético sistémico y con la señalización inflamatoria asociada a fenotipos vinculados a la dislipidemia. Los niveles alterados de apoC-III se utilizan ampliamente como una lectura molecular en estudios sobre hipertrigliceridemia, susceptibilidad a la aterosclerosis y mecanismos de riesgo cardiometabólico.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO apoC-III (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Apoc3 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Apoc3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Apoc3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína apoC-III.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Apoc3 para la investigación de la señalización de apoC-III, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Apoc3 críticos para la función de apoC-III
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Apoc3 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido apoC-III CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido apoC-III CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Apoc3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR apoC-III (m) y el plásmido HDR apoC-III (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Apoc3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Apoc3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.