Plasmide CRISPR/Cas9 KO Annexin A10 (h): sc-406977

Présentation

ANXA10 code pour l’annexine A10, un membre de la famille des annexines, des protéines liant le Ca²⁺ et les phospholipides impliquées dans des processus associés aux membranes. Bien que l’annexine A10 ne présente pas certaines caractéristiques canoniques de liaison au Ca²⁺ observées chez d’autres annexines, elle a été associée à la régulation de la différenciation des cellules épithéliales, au trafic membranaire et aux programmes de polarité cellulaire qui influencent l’homéostasie tissulaire. L’expression d’ANXA10 est enrichie dans certains contextes épithéliaux et a été reliée à des états transcriptionnels caractéristiques des lignages muqueux et glandulaires. Une dérégulation de l’expression d’ANXA10 a été rapportée dans plusieurs types de cancers et ANXA10 est fréquemment étudié comme marqueur d’une différenciation altérée et de la biologie des sous-types tumoraux.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Annexin A10 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène ANXA10 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du ANXA10, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert ANXA10 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Annexin A10.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en ANXA10 pour l'étude de la signalisation de Annexin A10, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de ANXA10 essentiels à la fonction de Annexin A10
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de ANXA10 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le Annexin A10 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Annexin A10 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus ANXA10. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le Annexin A10 plasmide HDR (h) et le Annexin A10 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie ANXA10 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles ANXA10 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.