Amelogenin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403337-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- AmelogeninO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Amelogenin (h) e o Plasmídeo Double Nickase Amelogenin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para AMELY. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Amelogenin Anticorpo (F-11): sc-365284
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Amelogenin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403337-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Amelogenin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403337-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AMELY codifica a isoforma de amelogenina do cromossomo Y, uma proteína secretada da matriz extracelular que contribui para a biomineralização do esmalte e para o desenvolvimento dentário por meio da regulação da nucleação e do crescimento de cristais de hidroxiapatita, bem como da organização da matriz. A amelogenina participa da montagem da matriz do esmalte e do processamento proteolítico durante a amelogênese, influenciando as interações epitélio–mesênquima e os programas de deposição mineral. Variações genéticas que afetam a expressão ou a estrutura da amelogenina têm sido associadas a defeitos de formação do esmalte e a fenótipos dentro do espectro de distúrbios da amelogênese imperfeita, reforçando sua relevância para a biologia do desenvolvimento craniofacial e dentário. Como AMELY é ligado ao Y e intimamente relacionado a AMELX, também é útil para estudar a biologia dos cromossomos sexuais e a regulação específica de parálogos em modelos odontogênicos.
Amelogenin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus AMELY em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de AMELY. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função AMELY. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com AMELY interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.