Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ALX4 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419095
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- ALX4 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico ALX4, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ALX4 Anticuerpo (KAB4): sc-33643
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
ALX4 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419095 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Alx4 codifica el factor de transcripción homeobox ALX4, un regulador nuclear de los programas de expresión génica del desarrollo que determinan el patrón craneofacial, la morfogénesis de las extremidades y del esqueleto, y la diferenciación mesenquimatosa. ALX4 influye en redes transcripcionales que controlan la proliferación y la identidad posicional, e interactúa con vías implicadas en el compromiso hacia el linaje osteogénico y en la formación de límites tisulares. En modelos murinos, la alteración de la función de Alx4 se asocia con defectos en el desarrollo de la bóveda craneal, malformaciones craneofaciales y anomalías en el patrón de los dedos, lo que respalda su utilidad como un nodo para el estudio de la morfogénesis congénita. Estas propiedades hacen de ALX4 una diana relevante para investigar los circuitos de regulación génica que subyacen al desarrollo esquelético y a los fenotipos del desarrollo relacionados.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO ALX4 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Alx4 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Alx4 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Alx4 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ALX4.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Alx4 para la investigación de la señalización de ALX4, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Alx4 críticos para la función de ALX4
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Alx4 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido ALX4 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido ALX4 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Alx4. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ALX4 (m) y el plásmido HDR ALX4 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Alx4 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Alx4 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.