Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ALR Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419093
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- ALR El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico ALR, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ALR Anticuerpo (E-7): sc-365885
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
ALR Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419093 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El gen **Gfer** del ratón codifica el **potenciador de la regeneración hepática (ALR)**, una oxidasa de sulfhidrilos dependiente de **FAD** que favorece la importación de proteínas mitocondriales y el plegamiento oxidativo a través de la vía **MIA40/CHCHD4** en el espacio intermembrana. Al regular la formación de puentes disulfuro y la homeostasis redox, ALR contribuye a la integridad mitocondrial, al metabolismo energético celular y a la resistencia frente al estrés oxidativo. La alteración de la actividad de ALR se ha vinculado con disfunción mitocondrial y fenotipos hepatocelulares y metabólicos, con efectos posteriores sobre la apoptosis, la inflamación y la homeostasis tisular. Estas funciones hacen de **Gfer** una diana relevante para desentrañar la señalización controlada por redox y el control de calidad mitocondrial en células de mamífero.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO ALR (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Gfer en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Gfer junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Gfer tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ALR.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Gfer para la investigación de la señalización de ALR, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Gfer críticos para la función de ALR
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Gfer para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido ALR CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido ALR CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Gfer. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ALR (m) y el plásmido HDR ALR (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Gfer para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Gfer definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.