20S Proteasome α8 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-414520

Übersicht

PSMA8 kodiert die 20S-Proteasom-Untereinheit Alpha 8, eine Komponente des Proteasomkerns, die über das Ubiquitin-Proteasom-System zum regulierten Proteinabbau und zur Peptidgenerierung beiträgt. Durch die Unterstützung der Proteasomenassemblierung und der proteolytischen Kapazität beeinflusst PSMA8 die zelluläre Proteostase, die Zellzyklusprogression sowie stressadaptive Antworten, die mit DNA-Schadenssignalen und der Antigenverarbeitung verknüpft sind. Störungen im Proteasomweg können Signalnetzwerke wie NF-κB und Apoptosekaskaden umgestalten, indem sie die Stabilität zentraler regulatorischer Proteine verändern. Eine dysregulierte Proteasomfunktion ist breit relevant für die Krankheitsbiologie, einschließlich krebsassoziierter Proteostase-Abhängigkeiten und immunbezogener Phänotypen, die durch veränderten Proteinabbau und Peptidpräsentation bedingt sind.

Das 20S Proteasome α8 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des PSMA8-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des PSMA8-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von PSMA8 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die 20S Proteasome α8-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von PSMA8-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der 20S Proteasome α8-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf PSMA8-Exone abzielen, die für die 20S Proteasome α8-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere PSMA8-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom 20S Proteasome α8 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom 20S Proteasome α8 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des PSMA8-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das 20S Proteasome α8 HDR-Plasmid (h) und 20S Proteasome α8 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von PSMA8-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten PSMA8-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.