α-defensin 5 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404991-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- α-defensin 5O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase α-defensin 5 (h) e o Plasmídeo Double Nickase α-defensin 5 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DEFA5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:α-defensin 5 Anticorpo (8c8): sc-53997
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
α-defensin 5 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404991-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
α-defensin 5 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404991-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DEFA5 codifica a α-defensina 5 humana, um peptídeo antimicrobiano catiônico produzido predominantemente pelas células de Paneth no intestino delgado e liberado no lúmen intestinal como parte da imunidade inata da mucosa. Após processamento proteolítico, a α-defensina 5 desestabiliza membranas microbianas e molda a composição da microbiota intestinal, ao mesmo tempo em que sustenta a função de barreira do epitélio e programas de defesa do hospedeiro. Sua expressão está ligada à diferenciação das células de Paneth e à biologia dos grânulos secretórios, e ela se integra a vias de sinalização inflamatória e de detecção microbiana que regulam a homeostase intestinal. Alterações nos níveis de DEFA5 e disfunção de células de Paneth têm sido associadas a condições inflamatórias intestinais e à suscetibilidade a infecções entéricas, tornando-o um marcador útil e um nó funcional em pesquisas de imunologia de mucosas.
α-defensin 5 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DEFA5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DEFA5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DEFA5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DEFA5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.