Wnt-8b Plasmide Double Nickase (h): sc-405077-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Wnt-8b Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Wnt-8b Double Nickase Plasmid (h) e il Wnt-8b Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira WNT8B. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Wnt-8b Plasmide Double Nickase (h) | sc-405077-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Wnt-8b Plasmide Double Nickase (h2) | sc-405077-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
WNT8B codifica la glicoproteina secreta Wnt-8b, un ligando che avvia la segnalazione canonica Wnt/β-catenina tramite i co-recettori Frizzled e LRP5/6, regolando la specificazione del destino cellulare, la proliferazione e la definizione dei pattern tissutali. L’attività di Wnt-8b contribuisce ai gradienti di morfogeni e ai programmi trascrizionali mediati da TCF/LEF, influenzando processi di neurosviluppo, inclusi il patterning del prosencefalo e del mesencefalo. Un’espressione deregolata di WNT8B o uno squilibrio della via di segnalazione è stato associato ad alterazioni degli stati differenziativi e a segnali di crescita aberranti osservati in diversi contesti patologici, supportandone l’utilizzo come nodo meccanicistico nella biologia guidata da Wnt. In quanto ligando di una via secreta, Wnt-8b è spesso studiata per i suoi effetti sulla segnalazione paracrina, sui fenotipi “stem-like” e sul cross-talk con gli output di segnalazione MAPK e PI3K/AKT.
Wnt-8b Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus WNT8B nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di WNT8B. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di WNT8B. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con WNT8B interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.