Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO WDPCP (h): sc-405848
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- WDPCP Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique WDPCP, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: WDPCP Antibody (A-5): sc-514151
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO WDPCP (h) | sc-405848 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
WDPCP (WD repeat-containing planar cell polarity effector) code une protéine associée au centrosome et au cil, nécessaire à la ciliogenèse primaire et à l’organisation liée à la polarité planaire des cellules. WDPCP favorise l’ancrage du corps basal et la formation de l’axonème, et contribue à l’assemblage ou au fonctionnement de modules de la zone de transition ciliaire qui coordonnent le trafic de composants de signalisation. Par son rôle dans les cils, WDPCP influence des voies dépendantes des cils telles que la signalisation Hedgehog, ainsi que des programmes plus larges du cytosquelette et de polarité, importants pour l’architecture des tissus épithéliaux. Une altération de la fonction de WDPCP est associée à des phénotypes de ciliopathie, incluant des anomalies du développement et des atteintes multisystémiques compatibles avec une perturbation de la signalisation ciliaire et de la morphogenèse.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO WDPCP (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène WDPCP dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du WDPCP, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert WDPCP à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine WDPCP.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en WDPCP pour l'étude de la signalisation de WDPCP, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de WDPCP essentiels à la fonction de WDPCP
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de WDPCP pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le WDPCP plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le WDPCP plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus WDPCP. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le WDPCP plasmide HDR (h) et le WDPCP (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie WDPCP pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles WDPCP définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.