The Double Nickase Plasmid features a U6 promoter for sgRNA expression, a 20 nt targeting sequence, and a gRNA scaffold to guide Cas9n. It includes a CBh promoter for Cas9n (D10A) and puromycin resistance, GFP for transfection verification, and nuclear localization signals (NLS). The 2A peptide allows co-expression of Cas9n and Puro from a single promoter, enabling precise genome editing with reduced off-target effects.
USP2双切口酶质粒(h): sc-411243-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- USP2 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- USP2双切酶质粒（h）和USP2双切酶质粒（h2）编码针对USP2的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
USP2双切口酶质粒(h) | sc-411243-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
USP2双切口酶质粒(h2) | sc-411243-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 USP2 基因编码泛素特异性肽酶 2（ubiquitin-specific peptidase 2），这是一种去泛素化酶，可从底物蛋白上移除泛素链，从而调控其稳定性、定位及信号输出。USP2 通过对通路组分进行选择性去泛素化，参与依赖泛素的蛋白质稳态维持（proteostasis），并调节控制细胞周期进程、凋亡、DNA 损伤应答以及炎症信号传导等通路。通过影响关键调控因子的周转，USP2 参与细胞应激适应与代谢稳态；其失调已在肿瘤生物学、免疫信号失衡以及神经退行性疾病中的蛋白聚集等情境下被研究。因此，USP2 是解析人类细胞中泛素调控网络与信号通路串扰的一个重要节点。
USP2 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 USP2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对USP2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏USP2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了USP2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。