TTC1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-426212

개요

마우스 Ttc1 유전자는 테트라트리코펩타이드 반복(TPR) 도메인 단백질 1(TTC1)을 암호화하며, TTC1은 다단백질 복합체의 접힘(folding)과 수송(trafficking)을 조율하는 단백질–단백질 상호작용에 관여하는 TPR-함유 스캐폴드로 알려져 있습니다. TTC1은 샤페론 연계 과정 및 세포 스트레스 대응, 단백질 항상성(proteostasis), 그리고 세포골격 또는 세포소기관 조직화에 영향을 주는 신호 전달 노드의 조절과 연관되어 왔습니다. 이러한 역할을 통해 TTC1은 핵심 조절 인자의 안정성과 조립을 형성함으로써 세포 주기 진행과 분화 프로그램에 영향을 줄 수 있습니다. 단백질 항상성과 신호 항상성의 붕괴는 신경발달 및 신경퇴행 연구 맥락과 종양 생물학 전반에서 폭넓게 중요하므로, Ttc1은 기전 연구에 유용한 표적 유전자좌입니다.

TTC1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Ttc1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Ttc1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Ttc1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 TTC1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 TTC1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Ttc1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• TTC1 기능에 중요한 Ttc1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Ttc1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• TTC1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 TTC1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Ttc1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  TTC1 HDR 플라스미드 (m) 및 TTC1 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Ttc1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Ttc1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.